高三生物如何掌握這些重要實(shí)驗(yàn)?
2019-01-11 21:39:10三好網(wǎng)
實(shí)驗(yàn)一:觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布
1.實(shí)驗(yàn)原理:利用甲基綠和吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色,可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布;甲基綠和吡羅紅對(duì)DNA和RNA的親和力不同:甲基綠+DNA→綠色
吡羅紅+RNA→紅色
2.分布:真核生物DNA主要分布在細(xì)胞核中;
線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量的DNA;RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。
3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果:細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色.
4.實(shí)驗(yàn)結(jié)論:DNA主要分布在細(xì)胞核中;RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中;
5.實(shí)驗(yàn)流程:
(1)取口腔上皮細(xì)胞制片:①載玻片上滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為:0.9%NaCl溶液;
�、谑诤螅孟狙篮灩慰谇粌�(nèi)壁后放在載玻片的液滴中涂抹幾下;③載玻片在酒精燈上烘干,蓋上;
(2)水解:①載玻片放入盛有30ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的HCl的小燒杯中;②大燒杯中加入30℃溫水;
③將小燒杯放入大燒杯中保溫5min;
(3)沖洗涂片:用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10s;
(4)染色:①吸水紙吸去載玻片的水分;②滴兩滴混合染液,染色5min;③吸去多余的染液,蓋上蓋玻片;
(5)觀察:先低倍后高倍;
6、幾種液體在實(shí)驗(yàn)中的作用:
(1)0.9%NaCl溶液:保持口腔上皮的正常形態(tài)。
8%的HCl:①改變細(xì)胞膜等的通透性;②使染色質(zhì)中的DNA與蛋白質(zhì)分開。蒸餾水:配置染液;沖洗載玻片。
(2)混合染液需要現(xiàn)配現(xiàn)用;
(3)該實(shí)驗(yàn)不宜用深色的材料,避免顏色對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾。
實(shí)驗(yàn)二:物質(zhì)鑒定
一、實(shí)驗(yàn)原理:還原糖+斐林試劑~磚紅色沉淀(水浴加熱)
脂肪+蘇丹III~橘黃色(滴液觀察或制片顯微鏡觀察)
脂肪+蘇丹IV~紅色
蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑~紫色反應(yīng)(不加熱)
1、還原糖的檢測(cè)
(1)材料的選取:還原糖含量高,白色或近于白色,如:蘋果,梨,白蘿卜。
(2)試劑:斐林試劑(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),現(xiàn)配現(xiàn)用。
(3)步驟:取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)→水浴
加熱2min左右→觀察顏色變化(白色→淺藍(lán)色→磚紅色)
實(shí)驗(yàn)三:觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)
1、材料:新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉,口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片
2、原理:葉綠體在顯微鏡下觀察,綠色,球形或橢球形。
用健那綠染液染色后的口腔上皮細(xì)胞中線粒體成藍(lán)綠色,細(xì)胞質(zhì)接近無(wú)色。
知識(shí)概要:取材、制片、低倍觀察、高倍觀察
實(shí)驗(yàn)四:觀察有絲分裂
1、材料:洋蔥根尖(蔥,蒜)
2、步驟:(一)洋蔥根尖的培養(yǎng)
(二)裝片的制作
3、實(shí)驗(yàn)原理:
(1)龍膽紫溶液能將染色體染成深色
(2)有絲分裂各個(gè)時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體的形態(tài)和行為變化不同,可用高倍顯微鏡根據(jù)各個(gè)時(shí)期內(nèi)染色體的變化情況,識(shí)別該細(xì)胞處于那個(gè)時(shí)期。
制作流程:解離→漂洗→染色→制片
1.解離:藥液:質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸,體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精(1:1混合液).時(shí)間:3~5min.目的:使組織中的細(xì)胞相互分離開來(lái).
2.漂洗:用清水漂洗約10min.目的:洗去藥液,防止解離過(guò)度,并有利于染色.
3.染色:用質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3~5min
目的:使染色體著色,利于觀察.
4.制片:將根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片.然后用拇指輕輕地按壓載玻片.
目的:使細(xì)胞分散開來(lái),有利于觀察.
(三)觀察
1、先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細(xì)胞:細(xì)胞呈正方形,排列緊密,有的細(xì)胞正在分裂。(長(zhǎng)方形:伸長(zhǎng)區(qū))
2、換高倍鏡下觀察:分裂中期→分裂前、后、末期→分裂間期。(注意各時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體形態(tài)和分布的特點(diǎn))。其中,處于分裂間期的細(xì)胞數(shù)目最多。
實(shí)驗(yàn)五:色素的提取和分離
1、原理:(1)葉綠體中的色素能溶解在有機(jī)溶劑丙酮或無(wú)水乙醇——提取色素(2)各色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上擴(kuò)散速度不同——分離色素
2、步驟:
提取色素
(1)稱取5g綠色葉片并剪碎提取色素
(2)加入少量SiO2、CaCO3和5ml丙酮
(研缽→研磨→漏斗過(guò)濾→,收集到試管內(nèi)并塞緊管口)
制濾紙條
(1)將干燥的濾紙剪成6cm長(zhǎng),1cm寬的紙條,剪去一端兩角(使層析液同時(shí)到達(dá)濾液細(xì)線)
(2)在距剪角一端1cm處用鉛筆畫線
濾液劃線
(1)用毛細(xì)管吸少量的濾液沿鉛筆線處小心均勻地劃一條濾液細(xì)線
(2)干燥后重復(fù)劃2-3次
紙上層析
(1)向燒杯中倒入3ml層析液(以層析液不沒(méi)及濾液細(xì)線為準(zhǔn))
(2)將濾紙條尖端朝下略微斜靠燒杯內(nèi)壁,輕輕插入層析液中
(3)用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯
觀察結(jié)果:濾紙條上出現(xiàn)四條寬度、顏色不同的彩帶。