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高三生物如何掌握這些重要實(shí)驗(yàn)?

2019-01-11 21:39:10三好網(wǎng)

  實(shí)驗(yàn)一:觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布

  1.實(shí)驗(yàn)原理:利用甲基綠和吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色,可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布;甲基綠和吡羅紅對(duì)DNA和RNA的親和力不同:甲基綠+DNA→綠色

  吡羅紅+RNA→紅色

  2.分布:真核生物DNA主要分布在細(xì)胞核中;

  線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量的DNA;RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。

  3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果:細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色.

  4.實(shí)驗(yàn)結(jié)論:DNA主要分布在細(xì)胞核中;RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中;

  5.實(shí)驗(yàn)流程:

  (1)取口腔上皮細(xì)胞制片:①載玻片上滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為:0.9%NaCl溶液;

 �、谑诤螅孟狙篮灩慰谇粌�(nèi)壁后放在載玻片的液滴中涂抹幾下;③載玻片在酒精燈上烘干,蓋上;

  (2)水解:①載玻片放入盛有30ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的HCl的小燒杯中;②大燒杯中加入30℃溫水;

  ③將小燒杯放入大燒杯中保溫5min;

  (3)沖洗涂片:用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10s;

  (4)染色:①吸水紙吸去載玻片的水分;②滴兩滴混合染液,染色5min;③吸去多余的染液,蓋上蓋玻片;

  (5)觀察:先低倍后高倍;

  6、幾種液體在實(shí)驗(yàn)中的作用:

  (1)0.9%NaCl溶液:保持口腔上皮的正常形態(tài)。

  8%的HCl:①改變細(xì)胞膜等的通透性;②使染色質(zhì)中的DNA與蛋白質(zhì)分開。蒸餾水:配置染液;沖洗載玻片。

  (2)混合染液需要現(xiàn)配現(xiàn)用;

  (3)該實(shí)驗(yàn)不宜用深色的材料,避免顏色對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾。

  實(shí)驗(yàn)二:物質(zhì)鑒定

  一、實(shí)驗(yàn)原理:還原糖+斐林試劑~磚紅色沉淀(水浴加熱)

  脂肪+蘇丹III~橘黃色(滴液觀察或制片顯微鏡觀察)

  脂肪+蘇丹IV~紅色

  蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑~紫色反應(yīng)(不加熱)

  1、還原糖的檢測(cè)

  (1)材料的選取:還原糖含量高,白色或近于白色,如:蘋果,梨,白蘿卜。

  (2)試劑:斐林試劑(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),現(xiàn)配現(xiàn)用。

  (3)步驟:取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)→水浴

  加熱2min左右→觀察顏色變化(白色→淺藍(lán)色→磚紅色)

  實(shí)驗(yàn)三:觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)

  1、材料:新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉,口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片

  2、原理:葉綠體在顯微鏡下觀察,綠色,球形或橢球形。

  用健那綠染液染色后的口腔上皮細(xì)胞中線粒體成藍(lán)綠色,細(xì)胞質(zhì)接近無(wú)色。

  知識(shí)概要:取材、制片、低倍觀察、高倍觀察

  實(shí)驗(yàn)四:觀察有絲分裂

  1、材料:洋蔥根尖(蔥,蒜)

  2、步驟:(一)洋蔥根尖的培養(yǎng)

  (二)裝片的制作

  3、實(shí)驗(yàn)原理:

  (1)龍膽紫溶液能將染色體染成深色

  (2)有絲分裂各個(gè)時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體的形態(tài)和行為變化不同,可用高倍顯微鏡根據(jù)各個(gè)時(shí)期內(nèi)染色體的變化情況,識(shí)別該細(xì)胞處于那個(gè)時(shí)期。

  制作流程:解離→漂洗→染色→制片

  1.解離:藥液:質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸,體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精(1:1混合液).時(shí)間:3~5min.目的:使組織中的細(xì)胞相互分離開來(lái).

  2.漂洗:用清水漂洗約10min.目的:洗去藥液,防止解離過(guò)度,并有利于染色.

  3.染色:用質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3~5min

  目的:使染色體著色,利于觀察.

  4.制片:將根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片.然后用拇指輕輕地按壓載玻片.

  目的:使細(xì)胞分散開來(lái),有利于觀察.

  (三)觀察

  1、先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細(xì)胞:細(xì)胞呈正方形,排列緊密,有的細(xì)胞正在分裂。(長(zhǎng)方形:伸長(zhǎng)區(qū))

  2、換高倍鏡下觀察:分裂中期→分裂前、后、末期→分裂間期。(注意各時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體形態(tài)和分布的特點(diǎn))。其中,處于分裂間期的細(xì)胞數(shù)目最多。

  實(shí)驗(yàn)五:色素的提取和分離

  1、原理:(1)葉綠體中的色素能溶解在有機(jī)溶劑丙酮或無(wú)水乙醇——提取色素(2)各色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上擴(kuò)散速度不同——分離色素

  2、步驟:

  提取色素

  (1)稱取5g綠色葉片并剪碎提取色素

  (2)加入少量SiO2、CaCO3和5ml丙酮

  (研缽→研磨→漏斗過(guò)濾→,收集到試管內(nèi)并塞緊管口)

  制濾紙條

  (1)將干燥的濾紙剪成6cm長(zhǎng),1cm寬的紙條,剪去一端兩角(使層析液同時(shí)到達(dá)濾液細(xì)線)

  (2)在距剪角一端1cm處用鉛筆畫線

  濾液劃線

  (1)用毛細(xì)管吸少量的濾液沿鉛筆線處小心均勻地劃一條濾液細(xì)線

  (2)干燥后重復(fù)劃2-3次

  紙上層析

  (1)向燒杯中倒入3ml層析液(以層析液不沒(méi)及濾液細(xì)線為準(zhǔn))

  (2)將濾紙條尖端朝下略微斜靠燒杯內(nèi)壁,輕輕插入層析液中

  (3)用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯

  觀察結(jié)果:濾紙條上出現(xiàn)四條寬度、顏色不同的彩帶。

[標(biāo)簽:生物知識(shí)點(diǎn) 生物復(fù)習(xí)]

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